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電泳儀的日常使用與維護(hù)保養(yǎng)

  • 發(fā)布日期:2018-08-25      瀏覽次數(shù):2080
    •   電泳儀的日常使用與維護(hù)保養(yǎng)
        1.儀器的使用
        1.1用蒸餾水將制膠玻璃板和梳子沖洗干凈,并用吹風(fēng)機(jī)將水分吹干,用夾子封閉玻璃板邊緣,在玻璃板支架上夾緊。
        1.2根據(jù)欲分離蛋白質(zhì)大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的凝膠;
        1.3將配好的分離膠溶液迅速加入制膠板中(約6mL),距梳子下端1cm左右,并在后加適量的飽和正丁醇;
        1.4室溫下60~90分鐘后分離膠*凝結(jié),清除凝膠頂端殘余的飽和正丁醇; 1.5配制濃縮膠溶液,并迅速加入制膠板中(約2mL),輕輕插入梳子,保證不氣泡產(chǎn)生;
        1.6室溫下30-60分鐘后濃縮膠*凝結(jié),小心拔出梳子,將凝膠板安放在電泳槽內(nèi);
        1.7向電泳槽中倒入電泳緩沖液,其量以沒(méi)過(guò)膠板頂端為宜,如樣品孔內(nèi)有氣泡,應(yīng)設(shè)法除去;
        1.8用移液槍將處理好的樣品(20mL)慢加入被浸沒(méi)的凝膠加樣孔內(nèi);
        1.9接通電源,紅色為正極,黑色為負(fù)極,一般濃縮膠電壓為80V,以濃縮膠和分離膠分割線為界,分離膠電壓為120V,電泳2~3h即可;
        1.10根據(jù)指示劑觀察泳動(dòng)的位置,判斷是否終止電泳;
        1.11電泳完畢,關(guān)上電源,在凝膠成像儀上觀察電泳帶及其位置,并與蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)Marker比較樣品蛋白質(zhì)大小。
        2.維護(hù)與保養(yǎng)
        2.1電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
        2.2儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
        2.3由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過(guò)的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
        2.4在總電流不超過(guò)儀器額定電流時(shí)(大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
        2.5某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開(kāi)機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開(kāi)機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
        2.6使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。

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